Notebook : July 22

Lab work

A - Aerobic/Anaerobic regulation system

Objective : obtaining BBa_K1155003, BBa_K1155007

1 - Digestion of BBa_I732017 by EcoRI/SpeI, BBa_K592009 by SpeI/PstI, BBa_B0015 and BBa_B0017 by PstI/XbaI

Anaïs

Used quantities :

• BBa_I732017 :
  • Buffer FD : 3µL
  • BBa_I732017 : 15µL
  • EcoRI FD : 2µL
  • SpeI FD : 2µL
  • H2O : 8µL

• BBa_K502009 :
  • Buffer FD : 3µL
  • BBa_K502009 : 15µL
  • PstI FD : 2µL
  • SpeI FD : 2µL
  • H2O : 8µL

• BBa_B0015 :
  • Buffer tango : 3µL
  • BBa_B0015 : 15µL
  • PstI FD : 1µL
  • XbaI FD : 2µL
  • H2O : 9µL

• BBa_B0017 :
  • Buffer tango : 3µL
  • BBa_B0017 : 15µL
  • PstI FD : 1µL
  • XbaI FD : 2µL
  • H2O : 9µL

We let the digestion 1h30 at 37°C and then we put it 30 min in the incubator at 37°C because the temperature of the bain-marie decrease at 31°C after 1h30.

2 - Inactivation of EcoRI/SpeI, SpeI/PstI and PstI/XbaI used for the digestion of BBa_I732017, BBa_K502009, BBa_B0015 and BBa_B0017

Zhou

Protocol : Ethanol precipitation

We used 30µL of DNA.