Notebook : July 8

Lab work

A - Aerobic/Anaerobic regulation system

Objective : BBa_K1155003, BBa_K1155007

1 - Digestion of BBa_K592009, BBa_I732017 by NotI, XhoI, EcoRI, EcoRI/PstI

Abou, Anaïs, Sheng, Zhou

Used quantities :

• NotI :
  • BBa_K592009 : 2µL
  • Buffer orange : 2µL
  • NotI : 0.5µL
  • H2O : 15.5µL

• XhoI :
  • BBa_K592009 : 2µL
  • Buffer red : 2µL
  • XhoI : 0.5µL
  • H2O : 15.5µL

• EcoRI :
  • BBa_K592009 : 2µL
  • Buffer orange : 2µL
  • EcoRI : 0.5µL
  • H2O : 15.5µL

• EcoRI/PstI :
  • BBa_I732017 : 2µL
  • Buffer orange : 2µL
  • EcoRI : 0.5µL
  • PstI : 0.5µL
  • H2O : 15µL

We let our digestion 1h30 at 37°C.

2 - Electrophoresis of the digestion of BBa_K592009, BBa_I732017 by NotI, XhoI, EcoRI, EcoRI/PstI

Abdou, Anaïs, Sheng, Zhou

Well 1 : 6µL DNA Ladder Well 2 : 5µL BBa_K592009 clone 1 digested by EcoRI+1µL of 6X loading dye Well 3 : 5µL BBa_K592009 clone 2 digested by EcoRI+1µL of 6X loading dye Well 4 : 5µL BBa_K592009 clone 1 digested by NotI+1µL of 6X loading dye Well 5 : 5µL BBa_K592009 clone 2 digested by NotI+1µL of 6X loading dye Well 6 : 5µL BBa_K592009 clone 1 digested by XhoI+1µL of 6X loading dye Well 7 : 5µL BBa_K592009 clone 2 digested by XhoI+1µL of 6X loading dye Well 8 : 5µL BBa_I732017 clone 1 digested by EcoRI/PstI+1µL of 6X loading dye Well 9 : 5µL BBa_I732017 clone 2 digested by EcoRI/PstI+1µL of 6X loading dye Well 10 : - Well 11 : - Well 12 : 6µL DNA Ladder Gel : 1%

Expected sizes :

• BBa_K592009 digested by NotI : 2046bp + 693bp
• BBa_K592009 digested by XhoI : 1842bp + 892bp
• BBa_I732017 : 3093bp